血跡的判斷

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諾發(fā)光試驗 用魯米諾0.1克， 過氧化鈉0.5克，加蒸餾水100毫升配制試劑。試驗時將所配試劑裝入玻璃噴霧器內(nèi)，在暗室內(nèi)或夜晚對檢材進行噴射。如為血跡，就會呈現(xiàn)出明顯的青白色發(fā)光現(xiàn)象。這一反應，也不具有特異性。


血跡檢驗，是最常見的法醫(yī)物證檢驗之一。它通常可以解決是不是血跡，是人血還是動物血，屬何種血型，是男人血還是女人血，以及出血部位、出血時間和出血量等問題，從而可以為偵查、審判提供重要的線索和依據(jù)。法醫(yī)物證檢驗，既可以是對人體中抽取的新鮮血液進行的血液檢驗，也可以是對干燥后的血塊或斑痕進行的血跡檢驗。這里我們主要介紹血跡檢驗。
為了保證檢驗得以順利進行，血跡檢驗通常采取肉眼檢查、須備試驗、確證試驗、種屬試驗、血型測定、性別檢驗和出血部位檢驗等的順序。

一、肉眼檢查

肉眼檢查是要發(fā)現(xiàn)血跡，觀察其顏色、形態(tài)和部位，以便為下一步的檢驗做好準備和打下基礎，并為確定案件性質，分析判斷案情提供幫助。
在殺人、傷害等暴力性案件中，現(xiàn)場物體上、被害人和罪犯身上都可能留有血跡。一般說來，血跡比較明顯可見，并不難發(fā)觀，但有時卻需要仔細檢查尋找才可能發(fā)現(xiàn)。
新鮮血液的顏色為鮮紅色，流出體外后由于血紅蛋白的變化而逐漸變?yōu)榘导t色、暗褐色，陳舊或經(jīng)溫熱過的血跡，呈灰褐色，腐敗血跡呈淡綠色或綠色。血跡如果附著在深色物體上，顏色不明顯。醬油、油漆、果汁、色素染料、被銹等斑跡，其顏色也可與血跡的顏色相似，應注意區(qū)別。
血跡因形成時的條件不同，形狀各異，大致有這么幾種類型：

1．滴狀血跡

血液垂直滴落在地面或物體上，形成圓滴狀血跡。其具體形狀又因滴落的高度和運動方向的不同而有區(qū)別。如果血液從0.1米以內(nèi)的高度落下來，血跡邊緣呈完整的圓狀；從0.5米左右的高度落下時，圓點邊緣可有明顯的鋸齒狀；從1米以上商度落下時，圓點邊緣不僅可見鋸齒狀，而且圓點周圍往往有逗點狀或線狀小血滴。如果血液在受傷者行進的或從運動的物體(如車輛)上滴落，血跡呈橢圓形，一端似星芒狀突起，突起的尖端指向運動的方向。

2.噴濺狀血跡

動脈血管破裂，由于心臟收縮產(chǎn)生的壓力和動脈血管壁的回縮彈力作用，血液噴射而出，在附近物體上形成狀似驚嘆號的噴濺血滴，其尖端指向噴濺方向。若用鈍器重復打擊而受傷出血，也可形成噴濺血跡，但其大小、形狀不一，分布分散。

3.流柱狀血跡

血液從創(chuàng)口流出，沿著身體或其他物體由高向低往下流，形成上薄下厚，上淡下濃的條狀血跡。

4.擦拭狀血跡

染有血液的物體或創(chuàng)口與其他物體接觸，并發(fā)生移動和摩擦，可以形成面積較大，濃淡不均的擦拭狀血跡。

5．接觸狀血跡

染有血液的物體或創(chuàng)口與其他物體接觸，未發(fā)生移動或摩擦，可以留下血印痕跡，如血手印、血腳印。接觸狀血跡能反應出染血物體或創(chuàng)口的外表形象特征。

6．血泊

血液大量流出，聚集成片，就可以形成血泊。血泊所在地常常就是受傷或被殺的第一現(xiàn)場。
此外，注意查看血跡遺留的位置和部位，有助于分析被傷殺者受傷時或臨死前的活動情況和當時所處的位置、姿勢。

二、預備試驗

該試驗為初步的、試探性的血跡檢驗，目的是為了解決有無血跡存在的可能性。預備試驗方法簡便，靈敏度高，但特異性差。陽性結果，只能證明檢材上有血跡存在的可能性，而不能肯定就是血跡。當然該試驗的陰性結果，可以排除有血跡存在的可能，也就不必再進行下一步的檢驗了。
血跡預備試驗的方法很多，常見的有聯(lián)苯胺試驗、酚酞試驗、氨基比林試驗、魯米諾發(fā)光試驗、紫外線檢查等。

1.聯(lián)苯胺試驗

本試驗靈敏度極高，只需微量檢材即可進行。試驗時，取少量檢材，放置在白色濾紙或白磁板上，然后依次滴入冰醋酸，聯(lián)苯胺無水酒精飽和溶液和3％的過氧化氫各一滴。如果檢材上有血跡存在，就會出現(xiàn)翠藍色反應，但這種反應其他物質也可能出現(xiàn)，并非血跡所特有。因而，該試驗若成陽性反應，只能說明檢材上可能有血跡。
2．紫外線檢查

血跡在紫外線照射下呈土棕色反應，因而，利用紫外線進行檢查，可以鑒別有無血跡存在的可能。

3．酚酞試驗

與聯(lián)苯胺試驗一樣，該試驗的靈敏度也非常高。試驗時，取少量檢材置白磁板上，用蒸餾水浸濕檢材，加還原酚酞試劑和3％過氧化氫各一滴，如是血跡，立即出現(xiàn)紅色。

4．魯米諾發(fā)光試驗

用魯米諾0.1克，過氧化鈉0.5克，加蒸餾水100毫升配制試劑。試驗時將所配試劑裝入玻璃噴霧器內(nèi)，在暗室內(nèi)或夜晚對檢材進行噴射。如為血跡，就會呈現(xiàn)出明顯的青白色發(fā)光現(xiàn)象。這一反應，也不具有特異性。

三、確證試驗

經(jīng)過預備試驗，如果檢材呈陽性反應，說明有血跡存在的可能性，需進一步進行確證試驗，以明確是不是血跡。與預備試驗相反，確證試驗特異性強，但靈敏度較低，如果檢材條件差，如經(jīng)日曬雨淋、混有雜質或已腐敗的血跡，則難以出現(xiàn)陽性反應。因而確證試驗的陽性結果可以肯定為血跡，陰性結果卻不能完全排除血跡存在的可能性。
確證試驗的方法也很多，如血色原結晶試驗、氯化血紅紫結晶試驗和光譜檢查等。

1．血色原結晶試驗

血跡中的血紅蛋白，在堿性溶液中分解成正鐵血鐵素和變性珠蛋白，再與還原劑作用，正鐵血紅素還原成血紅素，與變性珠蛋白或者其他含氮化合物結合可生成血色原結晶。根據(jù)這一原理進行試驗，利用血色原結晶出現(xiàn)情況就可以確定是否血跡。試驗時，先用10％氫氧化鈉水溶液3毫升，吡啶3毫升和30％葡萄糖水溶液l0毫升混合配制成試劑。取少量檢材，置于載玻片上，加所配試劑1—2滴，蓋上蓋玻片，梢加熱至冒小氣泡，冷卻后鏡檢。如為血跡，可出現(xiàn)櫻紅色針狀、菊花狀或星狀血色原結晶。

2．氯化血紅素結晶試驗

血液中血紅蛋白用酸作用破壞球蛋白，生成正鐵血紅素，與冰醋酸、氯化鈉作用，則生成游離氯，正鐵血紅素與游離氯作用生成褐色菱形氯化血紅素結晶。根據(jù)達一原理，試驗時，先用10％氯化鈉溶液2毫升，冰醋酸10毫升和無水酒精5毫升配制試劑，取檢材少許，置于載玻片上，加試劑1—2滴，蓋上蓋玻片，稍加熱，待冷卻后鏡檢。如系血跡，可見到褐色菱形結晶。

3.光譜檢查

日光通過有色液體時，其中某種波長的光線被吸收，在光譜上出現(xiàn)條狀陰影的吸收線。血跡中血紅蛋白及其衍生物均為有色物質，有很強的選擇吸收光譜的性能，具有特定的吸收線。根據(jù)這一特性，用顯微分光鏡檢查，可以鑒別是否血跡。光譜檢查，靈敏度高，簡便易行。

四、種屬試驗

經(jīng)過預備試驗和確證試驗確定為血跡后，還需要鑒別其種屬，確定是人血還是動物血。
血跡種屬試驗的方法也很多，如沉淀反應、瓊脂擴散試驗、對流電泳試驗、抗人球蛋白消耗試驗、纖維蛋白板試驗、膠乳顆粒凝集試驗和紅細胞凝集試驗等。

1．沉淀反應

人和各種動物的蛋白質都具有種屬特異性，將種屬不同的蛋白質分別注射入家兔體內(nèi)，在家免的血清中就會產(chǎn)生對所注射的蛋白質起特異反應的物質。這種物質再與相應的蛋白質作用，就會發(fā)生沉淀反應，出現(xiàn)白色沉淀環(huán)。通常我們把血清中這種起特異反應的物質叫著抗體，把注入的蛋白質叫作抗原，能與抗原發(fā)生沉淀反應的抗體血清叫免疫血清或沉淀素血清。免疫血清中的抗體只與相應的抗原發(fā)生沉淀反應。例如，注入人體蛋白質獲得的抗人免疫血清，只與人體蛋白質發(fā)生沉淀反應，而不與動物蛋白質發(fā)生沉淀反應。同樣，注入某類動物(如豬、牛、羊等)蛋白質獲得的抗該類動物免疫血清，也只與該類動物蛋白質發(fā)生沉淀反應，而不與人或其他動物的蛋白質發(fā)失沉淀反應。
根據(jù)這一現(xiàn)象，我們就可以通過制取免疫血清來鑒別血跡的種屬。試驗時，將檢材浸出液與抗人免疫血清重疊，如果呈陽性反應，即在檢材浸出液與抗人免疫血清之間的接觸面上生成白色沉淀環(huán)，便可證明是人血。同樣要確定檢材是何種動物的血跡，就用各種抗動物免疫血清與檢材浸出液相作用，看是否發(fā)生沉淀反應，以此來推斷種屬。

2．瓊脂擴散試驗

試驗時，先用瓊脂在玻璃板上制成瓊脂板，在瓊脂板中央打一小洞，距此洞周圍1.5厘米處，再打上數(shù)個小孔。將檢材浸出液注入中央洞穴內(nèi)，再在周圍小孔內(nèi)分別注入抗人免疫血清和對照液。如是人血，則盛有檢材浸出液和抗人血清的兩洞孔之間，經(jīng)過擴散就會形成一條白色沉淀帶。

五、血型測定

測定血型是血跡檢驗中最主要的檢驗項目之一，人體血液中含有各種血型物質，可以用來測定血型。法醫(yī)實踐中，如前所述，血型種類很多，目前最常進行的是ABO系統(tǒng)血型和MN系統(tǒng)血型的測定。

1．ABO系統(tǒng)血型的測定

紅細胞中抗原(凝集原)與血清中相應的抗體(凝集素)結合，如A抗原和抗A抗體相結合，紅細胞會發(fā)生凝集反應，凝集成塊狀或顆粒狀。根據(jù)這種凝集反應就可以判定血型。例如，用預先制備的抗A、抗B標準血清，分別與檢材稀釋液結合，如果檢材與抗A血清結合后紅細胞發(fā)生凝集，而與抗B血清結合后，紅細胞不發(fā)生凝集，即可證明檢材紅細胞中含有A凝集原，檢材為A型血；如果與抗A血清結合后紅細胞不發(fā)生凝集，與抗B血清結合后，紅細胞發(fā)生凝集，說明檢材紅細胞中含有B凝集原，檢材為B型血；如果分別與抗A、抗B血清結合后，紅細胞都發(fā)生凝集反應，說明檢材紅細胞中含有A、B兩種凝集原，檢材為AB型血；如果與抗A、抗B血清結合后，紅細胞都不發(fā)生凝集，說明檢材紅細胞不含A、B凝集原，檢材則為O型血。
血跡ABO系統(tǒng)的測定方法主要有兩種，一種叫凝集素檢驗法，即通過檢驗血跡中有無抗A、抗B凝集素來確定血型。另一種叫凝集原檢驗法，即通過檢驗血跡中有無A、B凝集原來測定血型。

(1)凝集素檢驗法：將檢材分為兩等份，分別置于栽玻片上的A、B兩端。用0.1％的A型紅細胞懸液1滴滴在A端檢材上，用0.1％B型紅細胞懸液1滴滴在B端檢材上，蓋上蓋玻片。再鏡檢看有無紅細胞凝集反應。如果A端檢材出現(xiàn)紅細胞凝集反應，證明檢材中有抗A凝集素，檢材可判定為B型血跡；B端檢材出現(xiàn)紅細胞凝集反應，說明檢材中有抗B凝集素，檢材可判定為A型血跡；如果A、B兩端均凝集，證明檢材中含有抗A、抗B兩種凝集素，檢材為O型血跡；如果A、B兩端均不發(fā)生凝集，表明檢材中無凝集素或者已被破壞而無法檢出，檢材或者為AB型血跡，或者無法判定。
凝集素容易受到外界條件的破壞，因此，該檢驗法只適用于血液和新鮮血跡的血型測定。

(2)凝集原檢驗法：它是通過驗凝集原的有無來測定血型的一種方法。由于凝集原保存時間輕長，一般不易破壞，因此，要測定陳舊血跡的血型，可用凝集原檢驗法。這一檢驗通常采用吸收試驗、熱解離試驗和混合凝集試驗三種方法來進行。

第一、吸收試驗：紅細胞凝集原與血清中相應的凝集素相結合時，前者能使后者被吸收而減少或者消失。如A凝集原吸收坑A凝集素，B凝集原吸收抗B凝集素。但是，這種吸收只能是相應的凝集原與凝集素之向的吸收，而不能在不同的凝集原和凝集索之間吸收。如A凝集原就不能吸收抗B凝集素，B凝集原就不能吸收抗A凝集素。根據(jù)這種吸收現(xiàn)象，可以測知檢材的血型。
試驗時，將檢材一分為二，分別浸泡在抗A、抗B標準血清中，讓檢材與血清充分結合后，將浸泡液稀釋，再分別加入A型、B型紅細胞懸液去探測稀釋液中有無抗A、抗B凝集素存在，是否已被撿材凝集原吸收而消失。檢材被抗A凝集素血清浸泡稀釋后，再加入A型紅細胞懸液，如果紅細胞發(fā)生凝集反應，說明抗A凝集素沒有被撿材吸收，檢材中無A凝集原，因而檢材不是A型血；如果紅細胞不發(fā)生凝集，說明抗A凝集素已被檢材吸收，檢材中有A凝集原，因而檢材可判定為A型血跡。余此可以類推，吸收試驗結果可*，但所需時間較長，檢材需要量較大，不宜用作微量血跡的檢驗。

第二、熱解離試驗：試驗時，讓血跡中凝集原分別與抗A、抗B血清中的凝集素結合后，清除未被吸收的凝集素，加熱至55～56℃，被吸收的凝集素又可解離出來。再加入A、B型紅細胞懸液，觀察有無凝集反應。如果加入A型紅細胞懸液而發(fā)生凝集反應，說明檢材中含有A凝集原，血型為A型。加入B型紅細胞懸液而發(fā)生凝集者，說明檢材中含B凝集原，血型為B型。均凝集者，說明檢材中含A、B兩種凝集原血型為AB型。均不凝集者，證明檢材中不含A、B凝集原，血型為O型。
該試驗靈敏、迅速，所需檢材量少，但技術條件要求高，操作規(guī)程嚴格。

第三、混合凝集試驗：本試驗采用雙重結合的辦法，讓檢材中凝集原與血清中抗A、抗B凝集素充分結合后，清除游離血清，再加入相應的A型、B型紅細胞懸液，則懸液中的紅細胞與已結合的抗A、抗B血清重新結合，出現(xiàn)紅細胞凝集或吸附反應。如果加入的是抗A血清和A型紅細胞懸液，檢材出現(xiàn)這種反應，說明檢材為A型血跡。如果加入的是抗B血清和B型紅細胞懸液，出現(xiàn)這一反應，說明檢樹為B型血跡。而無論加入抗A血清和A型紅細胞懸液，還是加入抗B血清和B型紅細胞懸液，都出現(xiàn)這一反應，檢材為AB型血跡。都不出現(xiàn)反應，檢材為O型血跡。

2．血跡MN系統(tǒng)的血型檢驗

血型測定，一般先進行ABO系統(tǒng)血型測定，再進行MN系統(tǒng)血型測定。MN血型測定的方法與ABO血型測定的方法基本相同。先制備抗M、抗N血清，檢驗時，用抗M、抗N血清分別浸泡檢材，再將浸泡液稀釋，根據(jù)稀釋液中抗M、抗N抗體被吸收的情況來測定血型。如果抗M抗體被吸收而消失，說明檢材中有M凝集原，檢材為M型血跡，若抗N抗體被吸收，檢材為N型血跡。都被吸收，檢材為MN型血跡。

六、血跡的性別檢驗

人類細胞核中有23對染色體，其中有一對為性染色體。正常女燭的性染色體為XX，正常男性的性染色體為XY。根據(jù)性染色體的這種差異，可以區(qū)分性別。血液白細胞核內(nèi)存在有性染色質，根據(jù)檢材中X、Y染色質的檢出率，可以判定檢材是女人血跡還是男人血跡。
血跡性別檢驗的方法，主要有兩種：X染色質檢出法和Y染色質檢出法。其中以Y染色質檢出法或兩種并用法獲得的檢驗結果較為可*。
血跡檢驗除以上六個方面的項目外，有時根據(jù)案情需要，還須對出血部位、血跡新舊程度和出血量等進行檢驗和判斷。